Смертосушенный реагент ПЦР в режиме реального времени для высокочувствительного обнаружения листерии моноцитогенной без необходимости холодной цепи

LyoDt^®Реагент для ПЦР в реальном времени в лиофилизированной форме для Тестов

Руководство по применению1. ОПИСАНИЕ

Listeria monocytogenes,

ТестовЭтот продукт представляет собой лиофилизированный реагент для ПЦР в реальном времени для

обнаружения Listeria monocytogenes .Тестовподозрительный, подтвердить повторным тестированием. ген  Listeria monocytogenes в качестве мишени для обнаружения.Тестов 2. СПЕЦИФИКАЦИИ И СОСТАВ Кат. №

Описание

Хранить при комнатной температуре

(5-30°C )0 секОбъем / тестподозрительный, подтвердить повторным тестированием. После вскрытия вакуумной упаковки, пожалуйста, храните неиспользованные продукты в прилагаемом пластиковом пакете с возможностью повторного закрытия с осушителями, подозрительный, подтвердить повторным тестированием. в алюминиевом пакете.ВНИМАНИЕ:Уменьшение размера гранул реагента является признаком попадания влаги в пробирку и увлажнения реагента. Любые реагенты со значительно меньшим размером гранул, чем обычно, следует утилизировать или протестировать с положительным контролем перед использованием 

для тестирования образцов 

.    4. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ1) 

Прибор для ПЦР в реальном времени

НПип

Положительный контроль можно хранить при комнатной температуре до регидратациии наконечники3) Безнуклеазная

смесивода4) Набор для выделения нуклеиновых кислот

ТемператураABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600

.

6. ПРИЕМЛЕМЫЕ ОБРАЗЦЫподозрительный, подтвердить повторным тестированием.

7. ПРОЦЕДУРА РАБОТЫ

1) 

Выделение

НуклеиновойCTислотыВыделите ДНК

из образцов с помощью подходящего набора для выделения. Рекомендуется элюировать ДНК примерно 100 мкл элюционного буфера (TE)безнуклеазной H 2O_{встряхивать на низкой скорости в течение 15-20 секунд и центрифугировать на низкой скорости в течение 15-20 секунд. Использовать немедленно или хранить}на заключительном этапе Объем / тест. Очищенную нуклеиновую кислоту следует использовать немедленно или хранить при -20°C.следует регидратировать перед использованием Приготовление положительного контроля

Положительный контроль можно хранить при комнатной температуре до регидратациидо 12 месяцев

.  Егоследует регидратировать перед использованием путем добавления 250 μlбуфера TE или безнуклеазной H2O, _{встряхивать на низкой скорости в течение 15-20 секунд и центрифугировать на низкой скорости в течение 15-20 секунд. Использовать немедленно или хранить}при -20°C.0 секподозрительный, подтвердить повторным тестированием.

смесидля ПЦР в реальном времениA) Откройте вакуумную упаковку и извлеките стрип из 8 пробироксреагентом. Убедитесь, что гранула находится на дне пробирки(

Отрежьте необходимое количество пробирокесли необходимо ). Если предоставленные пробирки несовместимы с вашим прибором, перенесите гранулу реагента в оптическую пробирку, совместимую с вашим прибором. B) Откройте пробирки и выбросьте крышки (не подходят для приборов для ПЦР в реальном времени) и приготовьте реакционную смесь на льду, как показано ниже.КомпонентОбъем / тестЛиофилизированный реагент

1

D) Встряхивайте пробирки на низкой скорости в течение 10–15 секунд и центрифугируйте при 3000 об/мин в течение 20 секунд и поместите их в прибор для ПЦР в реальном времени.

4) Настройка ПЦР в реальном времениУстановите объем реакции 25 мкл и процедуру амплификации ПЦР, как показано ниже. Соберите флуоресценцию FAM при 60°C и выберите NONE в качестве пассивного эталона.

Этап

ТемператураВремя

Циклы Предварительная денатурация

  МатрицаCTИнтерпретацияПоложительный контрольCT≤35Реагент годен.