LyoDt® лиофилизованный реагент обнаружения ПЦР в режиме реального времени для Шигеллы

LyoDt® лиофилизованный реагент обнаружения ПЦР в режиме реального времени для Шигеллы

1.Описание

Шигеллаявляется грам-отрицательной бактерией и распространенным патогеном, вызывающим заболевания кишечника у людей.Передача происходит в основном путем употребления загрязненной пищи (фекально-оральный путь), с наиболее распространенными симптомами, включающими диарею (водянистый стул), лихорадку и тошноту.

Этот препарат представляет собой осушенный в холодильнике реагент ПЦР в реальном времени для обнаруженияШигелла.Он использует высококонсервативный ген ipaHШигеллаЭто мастермикс, содержащий все необходимые ингредиенты, за исключением образца ДНК, и он предварительно распределяется в виде одного теста в трубках ПЦР для легкого использования.Этот продукт не требует холодной цепи для транспортировки и хранения, что значительно снижает расходы на доставку и исключает возможные потери в результате расхода реагента и загрязнения аэрозолями.

2Спецификации и состав

3. Хранение И срок годности

Хранить при температуре окружающей среды (5-30°C). Он стабилен до 12 месяцев. После того, как вакуумная упаковка будет открыта, пожалуйста, храните неиспользованные продукты в поставленном перезапечатываемом пластиковом пакете с осушителями,и в пакете из алюминиевой фольги.

ОТВЕТ:

Уменьшение размера гранула реагента указывает на проникновение влаги в трубку и на увлажнение реагента.Любые реагенты с значительно меньшим размером гранул, чем обычно, следует выбрасывать или тестировать с помощью положительного контроля перед использованием.для испытаний проб.

4Требуется дополнительное оборудование и реагенты.

1) Инструмент ПЦР в реальном времени

2) Пипеты и кончики

3) Вода без нуклеазы

4) Комплект экстракции нуклеиновой кислоты

5Совместимые ПЦР-системы в реальном времени

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6Приемлемые образцы

Бульон для обогащения пищи, рвота, образцы диареи и т.д.

7. Процедура операции

1) Экстракция нуклеиновой кислоты

Извлечь ДНК из образцов с помощью соответствующего комплекта экстракции.Рекомендуется:ДНК элюируется примерно на 100μl.элюзионного буфера(ТЭилиH без нуклеазы₂О)на последнем этапеэкстракция.Очищенную нуклеиновую кислоту следует использовать немедленно или хранить при температуре -20°C.

2) Подготовка к положительному контролю

Положительный контроль может храниться при температуре окружающей среды до 12 месяцев до регидратации.₂О, вихревые на низкой скорости в течение 15-20 секунд, и центрифугированы на низкой скорости в течение 15-20 секунд.

3) Подготовка смеси ПЦР в реальном времени

A) Откройте вакуумную упаковку и выведите 8-трубные полоски, содержащие реагент.Если поставленные трубы не совместимы с вашим прибором, переносите реагентную гранулу в оптическую трубку, совместимую с вашим прибором.

B) Откройте трубки и отбросьте крышки (не подходят для ПЦР в режиме реального времени) и приготовьте реакционную смесь на льду, как показано ниже.

* В качестве отрицательного контроля может использоваться вода без нуклеазы.

В) Закрыть ПЦР с помощью капсулы (полоски), подходящей для ПЦР в режиме реального времени ((не предоставлено).

D) Вращаем трубки на низкой скорости в течение 10 ~ 15 секунд, и центрифугируем при 3000 оборотах в минуту в течение 20 секунд и помещаем их в инструмент ПЦР в режиме реального времени.

2) Настройка RT-PCR

Установите объем реакции на 25μl и процедуру усиления ПЦР, как показано ниже.

3) Анализ и интерпретация результатов